В останні роки завдяки швидкому вдосконаленню мікрометодів штучного запліднення в лікуванні чоловічого безпліддя відбулися революційні зміни.
Розробку цих методів стимулювало як відсутність надійних способів терапії більшості випадків чоловічого безпліддя, так і низька ефективність звичайного ЕКЗ в таких випадках.
мікрометод штучного запліднення припускають «обхід» багатьох фізіологічних процесів, включаючи капацитации сперматозоїдів. Апробація цих методів показала, що найбільшу ймовірність вагітності забезпечують ті з них, які найбільш повно «обходять» фізіологічну послідовність процесу запліднення.
В основі микрометода штучного запліднення лежить звичайне ЕКО . Тому він також вимагає адекватної стимуляції яєчників, відбору зрілих яйцеклітин з преовуляторних фолікулів і перенесення запліднених яйцеклітин в порожнину матки.
Все різновиди микрометода відрізняються від звичайного ЕКЗ необхідністю відділення яйцеклітин від клітин кумулюса і радіальних корон. Це досягається частково за допомогою ферменту гіалуронідази, частково механічно за допомогою тонкої микропипетки.
Отримання свіжих яйцеклітин дозволяє надійніше ідентифікувати стадію їх розвитку (за наявністю полярного тільця) і відбирати з них найбільш якісні (по консистенції і кольору цитоплазми). Використання яйцеклітин з фрагментованим полярним тільцем, розширеним околожелточним простором і аномальними включеннями в цитоплазмі знижує ймовірність запліднення та імплантації.
Колишні мікрометоди штучного запліднення
Оскільки вважається, що самим важкоздоланною перешкодою для якісно неповноцінних сперматозоїдів служить прозора зона яйцеклітини, була розроблена методика її «просвердлювання». Створення невеликого отвору в прозорій зоні повинно було полегшувати запліднення. Після додавання до таких яйцеклітин великої кількості рухливих сперматозоїдів деякі з них отримували можливість прослизнути в отвір, завершити акросомной реакцію в околожелточном просторі і злитися з желточной мембраною.
Згодом з'явилося кілька методик « свердління »прозорої зони яйцеклітин людини: за допомогою мікрокраплі кислоти, протеолітичних ферментів і, нарешті, лазерного променя. Це дійсно підвищувало ймовірність запліднення, але вагітність все ще виникала вкрай рідко. Збільшити відсоток імплантації вдалося шляхом «штучної насічки» прозорої зони перед перенесенням ембріона.
Щоб ще більше полегшити проникнення сперматозоїдів в околожелточное простір, отвір в прозорій зоні збільшували шляхом часткового її відшарування від желточной мембрани. Для цього яйцеклітину злегка втягували в утримувач і пунктировані в косому напрямку мікроголки. Витяг мікроголки під прямим кутом до яйцеклітини призводило до надриву зони і відшарування її від желточной мембрани.
При субзональной ін'єкції сперматозоїдів один або кілька сперматозоїдів мікропіпеткою вводили в околожелточное простір між прозорою зоною і мембраною яйцеклітини.
До появи методу ІКСІ субзональная ін'єкція великого числа сперматозоїдів була найефективнішим варіантом микрометода штучного запліднення при важкому чоловічому безплідді.
Дефектні сперматозоїди не тільки погано взаємодіють з прозорою зоною після капацитации, у них порушена також акросомная реакція і здатність злиття з желточной мембраною яйцеклітини. Тому успіх був великим, коли в околожелточное простір вводили відразу кілька рухомих клітин.
Досвід показав, що у людини проникненню надлишкового числа сперматозоїдів перешкоджає не тільки прозора зона, а й желточная мембрана. Тому поліспермія в таких випадках відзначалася вельми рідко. В даний час методика субзональной ін'єкції сперматозоїдів в основному поступилася своїм місцем ІКСІ.
